無菌室潔凈度的檢測方法與步驟

無菌室在消毒處理后、無菌試驗前及操作過程中需要檢測空氣中的菌落數(shù)，以此來判斷無菌室是否達到規(guī)定的潔凈度。

一、無菌室潔凈度的檢測方法主要有沉降菌和浮游菌測定方法兩種：

（1）沉降菌檢測方法與標準：

以無菌方式將3個營養(yǎng)瓊脂平板帶入無菌操作室，在操作區(qū)臺面左、中、右各放1個；打開平板蓋，在空氣中暴露30min后將平板蓋好，置36℃±1℃培養(yǎng)48h，取出檢測，3個平板上生長的菌落數(shù)平均小于1個。

（2）浮游菌檢測方法及標準：

用專門的采樣器，宜采用撞擊法機制的采樣器（宏瑞科技FSC-A6），一般采用狹縫式或離心式采樣器，并配有流量計和定時器，嚴格按儀器說明書的要求操作并定時校驗，采樣器和培養(yǎng)皿進入被測房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌，使用的培養(yǎng)基為營養(yǎng)瓊脂或藥典認可的其他培養(yǎng)基。使用時，先開動真空泵抽氣，時間不少于5min，調(diào)節(jié)流量、轉(zhuǎn)盤、轉(zhuǎn)速。關閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上采樣器蓋子后調(diào)節(jié)縫隙高度。置采樣品采樣點后，依次開啟采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動定時器，根據(jù)采樣量設定采樣時間。

全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿置36℃±1℃培養(yǎng)48h，取出檢測，浮游菌落數(shù)不得超過5個/m3。每批培養(yǎng)基應選定3只培養(yǎng)皿做對照培養(yǎng)。

無菌操作臺面或超凈工作臺還應定期檢測其懸浮粒子，應達到100級（可用宏瑞科技塵埃粒子計數(shù)器）檢測，并根據(jù)無菌狀況必要時置換過濾器。

• 定期進行潔凈度再驗證：

定期或者當無菌室設施發(fā)生重大改變時，要換國家標準GB/T16292-16294-1996《醫(yī)藥工業(yè)無菌室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》進行潔凈度再驗證，以確保潔凈度符合規(guī)定，保存驗證原始記錄，定期歸檔保存，并將驗證結(jié)果記錄在無菌室使用登記冊上，作為實驗環(huán)境原始依據(jù)及趨勢分析資料。并定期對無菌室的環(huán)境檢測數(shù)據(jù)進行趨勢分析和評估，根據(jù)評估結(jié)果，了解無菌室設施環(huán)境質(zhì)量的穩(wěn)定狀況及變化趨勢，決定是否有必要修訂相應的警戒和糾偏限度。

• 定期更換新的紫外燈管、更換凈化系統(tǒng)的初效、中效、頭：

定期（至少每年1次）更換新的紫外燈管，以確保紫外燈管滅菌持續(xù)有效。并同時在使用登記本上做好更換記錄，定期歸檔保存。至少2年1次，或按無菌室驗證實際情況，定期更換初效、中效、頭以確保凈化系統(tǒng)的功能持續(xù)有效，并同時在使用登記本上做好更換記錄，定期歸檔保存。